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3D細胞培養(yǎng)基質膠
一、產品優(yōu)勢
1、基質膠為植物源:
A.無人畜共患病的病原菌或毒素污染
B.氨基酸序列100%人源化
C.成本低且易規(guī)?;罅可a
D.3D培養(yǎng)結束后基質膠可以融化
E.4度運輸
F.產品有效期2年
2、可用作醫(yī)療生物原料:
A.高安全、低過敏
B.高活性、高純度
C.最是適合人體研究
3、符合人體癌藥篩檢:
A.低成本且穩(wěn)定
B.3D癌組織培養(yǎng)系統(tǒng)
C.可用于精準人體癌藥篩檢
4、滿足生物原料需求:
A.自產關鍵原料
B.低成本
C.降低批次差異
D.人源化原料更精準
二、應用
•三維細胞球體培養(yǎng)試驗
•適合用于三維細胞藥物篩檢平臺
三、樣本類型
•腫瘤細胞系
四、試劑盒組分
五、使用步驟:
A、試劑制備
A 基質膠:將A 基質膠溶于 37℃水浴槽回溫 10分鐘, 確認*融解.
C 緩沖溶液(1X)制備: 使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細胞培養(yǎng)液(例如:無血清 DMEM、 opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
Biozellen®3D 細胞培養(yǎng)基質膠的制備
全部步驟需要在無菌環(huán)境內操作,操作步驟如下:
1. 將 24孔培養(yǎng)板放置于冰上預冷。
2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養(yǎng)基均勻混合,并與 0.5毫升 37℃ A 膠按照
1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度105~107cells/mL。
注:請選擇適當的培養(yǎng)溶液與條件進行試驗,貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養(yǎng)。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養(yǎng)板上, 膠體將于 5 分鐘內成膠。
注: 測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。
4.待膠體成膠后,添加 1 毫升冰的1X C 緩沖溶液,并蓋過步驟 3 的膠溶液,固定 15 分鐘。
5.待 15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養(yǎng)基溶液。
6將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內進行7~14天的培養(yǎng),并觀察細胞球體的形成,按正常培養(yǎng)基
更換頻率進行更換操作。
C、溶膠與收集細胞球體準備程序
小心的將培養(yǎng)基吸取移除,并用 1X PBS 進行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應 5 分鐘。
溫和的用 1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。
將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉速離心 10分鐘,移除上清液體并收集細胞
球體做分析。
D、收集單顆細胞準備程序
在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作
1. 添加 trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。
2. 用 1毫升移液管混合,直到細胞體*分解。
3. 待細胞球體*分解,加入 3 倍體積的 1X PBS,并用 1000 轉的轉速進行離心 10分鐘,并移除上清
液體收集沉淀的單細胞做分析。
深圳市安培生物科技有限公司是美國Biozellen公司的中國代理商。3D細胞培養(yǎng)基質膠大量現貨,經驗證可*替代BD/康寧的基質膠,來源為植物源且氨基酸序列100%人源化,無人畜共患病的病原菌或毒素污染,提供完整售后服務和技術支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經理聯系尋求幫助。