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進(jìn)口胎牛血清實驗時出現(xiàn)的黑點是怎么回事？

發(fā)布時間： 2021-12-04　　點擊次數(shù)： 1545次

　　進(jìn)口胎牛血清FBS是細(xì)胞培養(yǎng)中使用最多的生長因子，因為它含有高水平的營養(yǎng)，用于哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)以生產(chǎn)抗體、抗原、干細(xì)胞和疫苗的含血清和血清減少培養(yǎng)基的配制。用于免疫測定和印跡的封閉劑，所有胎牛血清都是*可追溯的，并且來自經(jīng)過審核的供應(yīng)商。在單獨容器中處理FBS，并對其進(jìn)行三次0.1μ無菌過濾，消除了任何交叉污染的可能性。
　　胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)過程中一旦發(fā)現(xiàn)有黑點出現(xiàn)，首先要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁；然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
　　如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么可能與以下幾種情況有關(guān)：
　　1.細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘??；
　　2.血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；
　　3.配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；
　　4.配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點；
　　5.培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。
　　胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點出現(xiàn)：
　　1.盡可能減少血清凍融次數(shù)；
　　2.培養(yǎng)基無需37℃水??；
　　3.培養(yǎng)基保持最佳PH值7.0-7.2；
　　4.嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗；
　　5.掌握細(xì)胞傳代的理想時機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老。

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