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    siRNA轉染操作及要點

    發(fā)布時間: 2023-08-07  點擊次數(shù): 1432次

    轉染試劑儲存

    轉染試劑-20°C避光保存,Trans Enhancer于2-8°C存放


    體外轉染操作流程

    1:細胞接種:轉染前一天接種細胞,使細胞在轉染時密度在30-50%

    2:siRNA-Starvio 轉染復合物準備:Starvio 用25ulTrans Enhancer 稀釋室溫孵育5min將siRNA稀釋液與 Starvio 稀釋液混合(總體積50ul)

    將轉染復合物加到培養(yǎng)的細胞內 


    注意事項

    1:建議對轉染條件進行優(yōu)化,特別是第一次使用。例如:24孔培養(yǎng)板,siRNA 用量在 6、12、18、24、30 pmol之間調整;

    2:Starvio 試劑用量在1.0-3.0ul之間調整;

    3:轉染過程盡量不要使用抗生素,否則會導致細胞死亡;

    4:增加計算接種細胞的數(shù)量,使轉染時細胞密度在30-50%左右。


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