細(xì)胞培養(yǎng)常遇見問題集錦第五期，小編繼續(xù)與大家探討細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)遇到哪些讓人煩惱的問題~

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問：請(qǐng)教一下大家，準(zhǔn)備從別的實(shí)驗(yàn)室借一瓶細(xì)胞，20分鐘之內(nèi)可以拿到自己的實(shí)驗(yàn)室，運(yùn)輸?shù)臅r(shí)候可以培養(yǎng)瓶里充滿培養(yǎng)基，封口膜包緊，常溫放在泡沫盒里嗎？那拿到自己的實(shí)驗(yàn)室后，在充滿培養(yǎng)基的情況下，倒掉一部分后，留10ml（25cm2皿）培養(yǎng)基繼續(xù)放培養(yǎng)箱培養(yǎng)就可以了對(duì)嗎？

答：可以，細(xì)胞沒那么脆弱。拿回來直接噴酒精扔進(jìn)去就可以了。

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▲問：這個(gè)769p 腎癌細(xì)胞最近幾天細(xì)胞間隙有很多小黑點(diǎn)，是貼壁的，傳代也沒有用，是污染嗎？跟雙抗有關(guān)嗎？因?yàn)橛行┤瞬患与p抗養(yǎng)細(xì)胞，那主要還是考慮營養(yǎng)不夠的原因嗎？

答：看著很瘦，好像營養(yǎng)匱乏。

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▲問：請(qǐng)問這個(gè)細(xì)胞是污染了嘛？那請(qǐng)問同樣培養(yǎng)基同一盒槍頭只有一瓶污染了是怎么回事呢？那請(qǐng)問菌混在氣溶膠中應(yīng)該怎么滅菌呢？

答：這是酵母菌污染。菌的話可以通過紫外滅菌和過氧化氫熏蒸。

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▲問：上兩圖是不是人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞污染了？用pbs洗洗不掉，而且越來越多，用的培養(yǎng)基是細(xì)胞公司那里購買的適配*培養(yǎng)基，才是第3次傳代，越傳越差，用的是不含EDTA的胰酶，之前說含EDTA的胰酶傳不了幾代細(xì)胞就不好了，但是不含EDTA的胰酶消化特別慢得7-8分鐘，時(shí)間短了吹不下來

答：好多死細(xì)胞，長時(shí)間不換液，肯定會(huì)變黃，應(yīng)該是細(xì)胞碎片，消化時(shí)間太長了，最好不超過5分鐘，可以分次消化，已消化的先傳皿，然后再消化還在貼壁的。

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▲問：這是什么污染嗎？

答：看不太清，有點(diǎn)像細(xì)胞碎片

▲問：胃黏膜上皮細(xì)胞，是細(xì)胞碎片還是污染？

答：可以用三抗搶救一下。

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