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    AO染色法（丫啶橙染色法）檢測(cè)細(xì)胞凋亡

    發(fā)布時(shí)間： 2021-11-01　　點(diǎn)擊次數(shù)： 3473次
    材料與儀器

    【試劑】pH4.8～6.0 Tritionx-100的PBS緩沖液， AO染料：將AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中，終濃度為6μg/ml，含Rnase100μg/ml，避光保存。 【儀器】熒光顯微鏡

    實(shí)驗(yàn)步驟

    制備活細(xì)胞懸液106 /ml； 取95μl細(xì)胞懸液，加5μl的AO染液混合、避光作用10min； 加入5ml PBS，1500r/min離心5min，棄上清，重復(fù)洗滌2次； 重懸細(xì)胞，吸一滴滴于玻片上并用蓋玻片封片；

    要點(diǎn)

    在熒光顯微鏡下，選用515nm激發(fā)光鏡檢：AO染色細(xì)胞DNA呈黃色或黃綠色。當(dāng)細(xì)胞凋亡時(shí)，染色呈致密濃染的黃綠色熒光或見(jiàn)黃綠色碎片。


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